DIÁLISIS DE LA PROTEÍNA OVOALBÚMINA

FUNDAMENTO TEÓRICO 

La diálisis es una técnica común de laboratorio, y funciona con el mismo principio que diálisis médica. Típicamente una solución de varios tipos de moléculas es puesta en un bolso semipermeable de diálisis, como por ejemplo, en una membrana de la celulosa con poros, y el bolso es sellado. El bolso de diálisis sellado se coloca en un envase con una solución diferente, o agua pura. Las moléculas lo suficientemente pequeñas como para pasar a través de los poros (a menudo agua, sales y otras moléculas pequeñas) tienden a moverse hacia adentro o hacia afuera del bolso de diálisis en la dirección de la concentración más baja. Moléculas más grandes (a menudo proteínas, ADN, o polisacáridos) que tiene dimensiones significativamente mayores que el diámetro del poro son retenidas dentro del bolso de diálisis. Una razón común de usar esta técnica puede ser para quitar la sal de una solución de la proteína. 

MATERIALES: 

- Dializador (gomita elástica, botella cortada, papel celofán)  

- Ovoalbúmina

- AgNO3 (Nitrato de Plata)

- Vaso de Bohemia

- NaCl disociado 

- Agua destilada 

Esquema Ilustrativo del Sistema

PROCEDIMIENTO:

• Primera Parte (Interior):

1. Colocar en dos tubos de ensayo una pequeña muestra de la solución a dializar. 
2. Aplicarle la reacción de Biuret y AgNO3
3. Anotar observaciones

En agua, tanto el AgNO3 como el NaCl de disocian de la siguiente manera:

AgNO3  --->  (Ag +)     +    (NO3-)  (ac)

              Catión Plata      Anión Nitrato

NaCl     --->   (Na+)     +     ( Cl -) (ac)

              Catión  Sodio    Anión Cloruro

Para luego:

(Ag+) (ac) + (Cl-)  (ac)   --->  AgCl (s)

Cloruro de Plata

El AgCl es un sólido  blanco, y es su formación lo que determina que el ensayo sea positivo o negativo.

RESULTADOS

Tanto la reacción Biuret como la de AgNO3 dieron positivas para el interior del sistema ya que que la reacción Biuret dio color violeta y la de AgNO3 dio blanco.

• Segunda Parte (Exterior):

1. Colocar dentro de un dializador una solución con proteínas y sales.
2. Sumergir en un vaso de Bohemia con agua destilada.
3. Pasado un tiempo, tomar muestras de ambas partes del dializador.
4. Aplicar los ensayos anteriores .
5. Anotar las observaciones.

RESULTADOS:

• Biuret: POSITIVO
• AgNO3: POSITIVO

Una vez obtenidos estos datos, podemos afirmar que a pesar que el ensayo de AgNO3 dio positivo, la concentración de sales de la muestra bajo considerablemente. Como ya dijimos anteriormente, las proteínas de la muestra no pudieron atravesar la membrana semi permeable del dializador, razón por la cual el ensayo de Biuret aplicado en esta muestra dio positivo. 

ESTO NOS PERMITE CONCLUIR QUE LA DIÁLISIS FUNCIONO.